INSTITUTO NACIONAL DE SALUD

División de Biología Molecular
Dra. Ysabel Montoya
Dirección: Capac Yupanqui 1400. Jesus Maria. Lima
Telefax: (+51-1) 471 9920 anexo 129
E-mail: ymontoya@ins.sld.pe

Líneas de investigación:
Entomología Molecular.
Desarrollo de kits de diagnóstico usando técnicas de biología molecular.
Resistencia a drogas de Plasmodium falciforme por PCR.

Proyectos:

• "Diagnóstico por nested PCR para Dengue (DEN-1, DEN-2, DEN-3, DEN-4).
• "Análisis del polimorfismo genético del gen de la glicoproteína E del Virus Dengue."
• "Clanamiento molecular de la proteína NSI de Dengue"
• "Diagnóstico molecular por PCR para brucellosis, fiebre amarilla, leishmaniasis."
• "Variabilidad genética y resistencia a drogas en aislamientos de P. falciparum por PCR."
• "Polimorfismo genético de Brucella melitensis."
• "Entomología molecular."
• "Genes involucrados en la respuesta humoral de leishmaniasis y la enfermedad de Chagas."
• "Caracterización molecular de clones de cDNA perteneciente a las bibliotecas de Leishmania (V)peruviana y L.(V) braziliensis."
• "Recombinant antigens as serological tools for specific and sensitive tegunmentary and visceral Leishmaniasis diagnostic"

Financiamiento: Comisión de las Comunidades Europeas
Monto: 166,000 ecus

Resumen:
Desarrollo de un test de diagnóstico para leishmaniasis tegumentaria Americana usando peptidos recombinantes, para lo cual se está realizando la selección y validación de antígenos sintéticos (diseñados en el laboratorio); así como, la determinación del potencial diagnóstico de proteínas de extractos crudos de Trypanosoma cruzi, mediante técnicas de Western Blot y Dot- ELISA.

"Evaluation of recombinant peptides with immunological specificity for American Tegumentary Leishmaniasis"

Financiamiento: Organización Mundial de la Salud
Monto: US $ 20,000
Resumen:
Obtención de nuevos antígenos recombinantes a partir de aislamientos clínicos de leishmaniasis en Peru para el diagnóstico de la enfermedad. Asimismo, análisis molecular de los genes que codifican el antígeno seleccionado.
Cooperación:
Comunidad Europea: Inglaterra, España. OMS/OPS.
Fundación "Oswaldo Cruz" de Brazil.
Instituto "Fatalan Chaban" de Argentina.
Instituto de Medicina Tropical "Alexander von Humbolt" de la Universidad Peruana Cayetano Heredia.

Publicaciones:

• Carrillo, C., Nolasco, O., Cabezas, C., Douglas,S. García, M., Yábar, C. & Montoya, Y. 1998. Dengue in Perú: Molecular Characterization and DNA sequencing from Dengue 1 and 2. American Society of Tropical Medicine and Hygiene.
• Nolasco, O., Carrillo, C., Gutierréz, V., Yábar, C. Douglas,S. & Montoya, Y. 1997. Diagnóstico temprano en un brote epidémico del virus Dengue en Piura usando RT-PCR y Nested PCR. Revista de Medicina experimental del INS.
• Montoya,Y., Padilla, C., Nolasco, O., León, C., Talledo M., Choque, J., Cáceres, O., Barrteo, T., De los Santos, M., Campos, Y., Douglas, S., Yábar, C., & Barker, D. 1997. Diagnóstico Molecular para Leishmaniasis. Revista de Medicina Experimental del INS
• Montoya, Y., Leób, C., Talledo, M., Nolasco, O., Padilla, C., Muñoz Nájar, U. & Bárker,D. 1997 Recombinant antigens for specific and sensitive serodiagnosis of latinamerican tegumentary leishmaniasis. Transactions of the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene.
• Cáceres, O., Barker, D., & Montoya, Y. 1997 Histones H2B primers for specific leishmanisis diagnosis. EUROLEISH VI: Epidemiology of Leishmaniasis.
• Anaya, E., Montoya, Y., & Carrillo, C. 1997 Proteínas inmunodominantes de Brucella melitensis evaluadas por Western Blot. Revista de Medicina experimental del INS.
• Montoya, Y.; C. Cañavate, C. Leon, J. Arevalo, J. Baker, D. LLanos-Cuentas y J. Alvar. (1994). Recombinant clones expressing peptides with immunological specificity for American Tegumentary Leishmaniasis and Visceral Leishmaniasis. Euroleish V Workshop. Liverpool, Inglaterra.

Resumen:
Se ha construido una librería genómica para la identificación de clones recombinantes, capaces de expresar peptidos de gran especificidad inmunológica para el diagnóstico de Leishmaniasis. Los clones obtenidos son evaluados en presencia de suero de pacientes, con el objetivo de seleccionar antígenos que puedan ser usados para el desarrollo de tests ELISA para diagnóstico de la enfermedad.

• Lopez, M., Y. Montoya, M. Arana, F. Cruzalegui, J. Braga, A. Llanos-Cuentas, G. Romero, y J. Arevalo. (1988). The use of non-radioactive DNA probes for the characterisation of Leishmania isolates from Peru. American Journal of Tropical Medicine Hygiene. 38(2):308-314.

Resumen:
Se describen las condiciones para la hibridización dot blot de DNA usando sondas biotiniladas de kDNA de Leishmania. La sensibilidad y especificidad que se logra con sondas biotiniladas o marcadas con fósforo radioactivo son equivalentes. El mínimo nivel de detección obtenido fue de 100 parásitos adheridos a papel de nitrocelulosa (dot blot) y tratados con Proteinasa K. Los estudios se realizaron en 112 aislamientos de Leishmania de pacientes con uta y espundia, y se determinó que todos pertenecían al complejo de Leishmania braziliensis.

Laboratorio:

Area: Aprox. 100 m2 (4 salas)
Equipo: cámara flujo laminar, autoclave, destilador, liofilizador, congelador -80C, microscopios, centrifuga, electroforesis de DNA y proteínas, speed vac, western blotter, secuenciador, transiluminador.
Técnicas: Extracción/purificación de DNA, purificación de proteínas, transformación de células, sondas de DNA (RFLP/PCR), western blot, expresión de proteínas recombinantes y peptidos sintéticos, bibliotecas genómicas.
Personal estable:
Para contactarse con ellos ymontoya@ins.sld.pe

 
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